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Histopatologia quali-quantitativa de gônadas femininas e masculinas em Danio rerio submetidos à ensaios crônicos com o azocorante alimentar amarelo tartrazina



Author(s): Da Silva, J.; Fracacio, R.;
Presenter: Renata Fracacio Francisco

Os azocorantes são um grupo de corantes bastante utilizados em diversos setores
industriais, inclusive no setor alimentar, onde é extensivamente utilizado devido às
cores brilhantes que adiciona aos alimentos; pesquisas toxicológicas comprovam
variados efeitos adversos aos organismos, incluindo mutagenicidade, citogenicidade e
geneticidade, mas há poucas pesquisas ecotoxicológicas. Esta pesquisa utilizou o peixe
Danio rerio para responder se concentrações dos corantes permitidas para o uso em
alimentos, poderá causar danos a biota aquática. A pesquisa foi realizada submetendo-se
os peixes a ensaios crônicos de vinte e um dia, em concentrações de 50 mg.L -1 em dois
padrões de corantes; um padrão comercial (PC) e outro padrão analítico (PA), e em
concentrações de 500 mg.L -1 para o corante padrão analítico (PA). Após esse período,
foram realizados três reproduções e o número médio de ovos nas reproduções das
concentrações foram maiores que o número médio do controle, no entanto, após 72 hpf
(horas pós fertilização), o número de larvas viáveis no controle foi 40% maior que nas
concentrações dos corantes. Após as reproduções, machos e fêmeas foram eutanasiados
e suas gônodas cortadas histologicamente, para obtenção dos tecidos gônadais expostos
aos corantes. Foi realizada a microtomia seriada no abdômen total dos organismos-
testes, com espessuras variando entre 4μm e 6μm, utilizando-se de navalhas de aço
descartáveis, em micrótomo modelo Micron HM 340E, a coloração utilizada foi a
Hematoxilina-Eosina (HE). Em cada tratamento e controle, cinco peixes fêmeas e cinco
peixes machos foram completamente cortados, considerando-se a profundidade do corte
no tecido, como fase de cortes iniciais, intermediários e finais, objetivando-se obter uma
análise quantitativa. Foram analisadas cinco lâminas de cada fase, totalizando quinze
lâminas para cada peixe e para cada tratamento, em microscópio óptico (Leica
Application Suite - DM 3000 LED) e fotografados. As fotos foram analisadas, segundo
alterações nas estruturas das gônadas quando comparados aos tecidos-controle. As
análises histológicas das gônadas femininas do controle revelaram padrão normal de
distribuição e maturação gonadal, mostrando células em diferentes fases de
desenvolvimento e ovários em diferentes estádios de maturação gonadal e as do controle
masculino, a análise histológica gonadal do controle mostrou um padrão normal de
desenvolvimento com todas as fases de desenvolvimento das células germinativas, a

espermatogônia; fase secundária com divisões meióticas responsáveis pela formação
dos espermatócitos e espermátides e a fase final de diferenciação das espermátides em
espermatozoides, além da presença das células de Leydig responsáveis pela produção de
hormônios esteróides em peixes e células de Sertoli, que facilitam a sobrevivência e
desenvolvimento das células germinativas de modo que a espermatogênese possa
fornecer células suficientes para garantir a fertilidade. Nas lâminas das concentrações do
corante, as gônadas femininas apresentaram predominância de vitelogênese completa
avançada e alterações morfológicas de 14% a 26% em todas as concentrações, e nas
concentrações 50 mg.L -1 PA e 500 mg.L -1 PA, apresentaram oócitos atrésicos e basófilos
atípicos. Nas gônadas masculinas observou-se regiões de degeneração gonodal em todas
as concentrações e ausência de espermatocistos nas concentrações de 50 mg.L -1 PC e
500 mg.L -1 PA. Nas concentrações 50 mg.L -1 PA e 500 mg.L -1 PA foram encontradas
alterações nas células de Sertoli e nas células de Leyding. As alterações nas gônadas das
concentrações foram de 15% a 30%. Este estudo mostrou que a exposição dos D. rerio
ao corante amarelo tartrazina afetou seu desenvolvimento sexual, prejudicando a
histologia das gônadas, induzindo alterações histopatológicas graves. O corante amarelo
tartrazina, tanto o padrão analítico, quanto o padrão comercial apresentaram efeitos
tóxicos nos órgãos reprodutivos de fêmeas e machos de D. rerio, desde a menor
concentração testada (50 mg.L -1 ).


Keywords: corante; gônadas; peixes

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